PEMBAHASAN
Kadar Hambat Minimal (KHM) adalah konsentrasi antibiotik
terendah yang masih dapat menghambat pertumbuhan mikroba tertentu. KHM dapat
ditentukan dengan prosedur tabung dilusi. Prosedur ini digunakan untuk mentukan
konsentrasi antibiotik yang masih efektif untuk mencegah pertumbuhan patogen
dan mengidentifikasikan dosis antibiotik yang efektif dalam mengontrol infeksi
pada pasien (Radji, 2004).
Metode dilusi menggunakan senyawa antimikroba dengan
kadar yang menurun secara bertahap, baik dengan media cair atau padat. Pada
percobaan kali ini menggunakan metode dilusi cair. Perlakuan secara umun adalah
pada media yang diinokulasi mikroba uji, dilarutkan senyawa antimikroba, dan
kemudian diamati pada konsentrasi berapakah senyawa antimiroba tersebut bersifat
menghambat. Uji mikrodilusi cair dapat memberikan hasil kuantitatif yang
menunjukan jumlah antimikroba yang dibutuhkan untuk mematikan bakteri.
Tujuan
percobaan ini adalah untuk menentukan KHM ekstrak etanol buah sawo (Achras zapota L.) terhadap pertumbuhan
bakteri Escherichia coli. Metode
ektrasi yang digunakan adalah ekstrasi soxhlet. Ektrasi soxhlet adalah ekstraksi
antara padat dan cair yang digunakan untuk memisahkan analit yang terdapat pada
padatan menggunakan pelarut organik. Penarikan komponen kimia yang dilakukan dengan cara ekstraksi Soxhlet
ditempatkan dalam timbel yang telah dilapisi kertas saring sedemikian rupa,
cairan pelarut dipanaskan dalam labu alas bulat sehingga menguap ke atas dan
dikondensasikan oleh kondensor menjadi molekul-molekul cairan yang jatuh ke
dalam thimble menyaring zat aktif di dalam sampel dan jika cairan pelarut telah
mencapai permukaan syphon arm, seluruh cairan akan turun kembali ke labu alas
bulat melalui pipa kapiler hingga terjadi sirkulasi atau juga disebut satu
siklus ekstraksi.
Konsentrasi
ekstrak etanol pada uji awal adalah 0%, 25%, 50% dan 100%. Konsentrasi tersebut
kemudian diturunkan untuk mengetahui konsentrasi hambat minimum. Konsentrasi
yang ekstrak etanol buah sawo pada uji selanjutnya adalah 0%, 2,5%, 5%, 7,5%,
10%, 12,5%, 15%, 17,5%, 20%, 22,5%, dan 25%.
Penghambatan
total terhadap pertumbuhan koloni bakteri Escherichia coli tampak pada
perlakuan dengan konsentrasi ekstrak buah sawo muda sebesar 22,5%. Hal ini
berarti, konsentrasi hambat minimal (KHM) yang dapat menghambat pertumbuhan
koloni bakteri Escherichia coli adalah konsentrasi ekstrak buah sawo
muda sebesar 22,5%. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, ekstrak buah
sawo muda dengan konsentrasi 22,5% diketahui memiliki kemampuan yang setara
dengan kontrol positif yaitu larutan ampicilin 1% dalam menghambat pertumbuhan
koloni bakteri Escherichia coli.
Pada
penelitian Sebayang (2010) diperoleh data bahwa dalam buah sawo terdapat
kandungan senyawa metabolit sekunder yaitu flavonoid, glikosida dan tanin. Flavanoid
dapat berperan langsung sebagai antibiotik dengan mengganggu fungsi dari
mikroorganisme seperti bakteri atau virus. Flavonoid berdasarkan penelitian
dapat menghambat pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus
aureus.
Selain
flavonoid, kandungan senyawa metabolit sekunder lainnya yang diduga juga
bersifat sebagai antibakteri adalah tanin. Tanin mempunyai daya antibakteri
dengan cara mempresipitasi protein, karena diduga tanin mempunyai efek yang
sama dengan senyawa fenolik. Efek antibakteri tanin antara lain melalui: reaksi
dengan membran sel, inaktivitasi enzim dan dekstruksi atau inaktivitasi fungsi
materi genetik.
Adanya
kemampuan ekstrak buah sawo muda dengan konsentrasi sebesar 22,5% dalam
menghambat pertumbuhan total koloni bakteri Escherichia coli ini
membuktikan bahwa buah sawo muda berpotensi untuk digunakan sebagai salah satu
bahan obat untuk menghambat pertumbuhan bakteri yang biasanya menjadi penyebab
diare, yaitu Escherichia coli.
